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    珠海鼠尾膠原廠(chǎng)家

    發(fā)布時(shí)間:2024-06-30 18:49:04   來(lái)源:大洲海通科技服務(wù)有限公司   閱覽次數:32741次   

    使用方法:1、細胞培養器皿的表面包被:以包被濃度為2μg/cm2為例,用無(wú)菌0.006mol/L乙酸將膠原蛋白稀釋到0.012mg/mL。加到相應的培養器皿中,確保膠原蛋白溶液鋪滿(mǎn)器皿的表面。開(kāi)蓋在超凈臺上過(guò)夜晾干,也可以在室溫放置1小時(shí)后,用PBS洗3~4次后直接使用。包被好的器皿在4~25℃至少可保存三個(gè)月以上的時(shí)間。2、三維膠原凝膠的制備:A、無(wú)細胞三維膠原凝膠的制備(以配制1mg/mL三維膠1mL為例)將200μL本品加到置于冰浴的離心管中,加入690μL雙蒸水,然后加到12μL0.1mol/LNaOH中(如果反過(guò)來(lái)把12μL0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會(huì )由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結),立即混勻。再加入100μL10×PBS或10×培養液,混勻后立即加到培養器皿中(混勻后pH為7左右,如果PBS或培養液中沒(méi)有加酚紅,初次使用時(shí)需要測定pH值)。將培養器皿在室溫放置20min待膠凝固后,轉移到培養箱內。如果配制中使用的是10×PBS,使用前需要加入適當體積的細胞培養液預平衡。成功建立了利用自制鼠尾膠原培養大鼠耳蝸邊緣細胞的方法,并且制作簡(jiǎn)便,成本低廉。珠海鼠尾膠原廠(chǎng)家

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    鼠尾膠原是一種天然培養基和一種天然的黏附劑,可用于細胞培養皿的包被,特別適合普通細胞培養器皿不易貼壁細胞的培養;也可用于制備三維膠原凝膠,使細胞在模擬的三維環(huán)境中生長(cháng)。制備鼠尾膠原方法:1、取大鼠尾巴洗凈,75%酒精浸泡5分鐘;2、手持尾巴,用止血鉗夾住鼠尾的較高,折斷尾骨后拉出尾腱;3、將尾腱剪斷置于平皿中,生理鹽水浸泡;4、重復步驟2、3,直至尾腱量夠用;5、吸去生理鹽水,將尾腱稱(chēng)重(0.5-1克);6、將尾腱置于平皿內剪碎,轉移至三角燒瓶中;7、按每克尾腱50ml的比例,加入0.1%醋酸溶液;8、搖晃,使尾腱分散于醋酸溶液中,4℃放置一星期;9、離心,4000轉/分,10-15分鐘;10、吸取上清,分裝成小瓶,4℃保存。天津鼠尾膠原生產(chǎn)廠(chǎng)家膠原蛋白(Collagen)是結締組織和內臟部位外基質(zhì)的主要成分。

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    一種基于鼠尾膠原蛋白:1.一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,為鼠尾膠原蛋白、聚乙烯醇、殼聚糖、水制成的凍干止血材料,各材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇殼聚糖為1-10%0.2-5%0.2-2%,余量為水。2.根據權利要求1所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,其特征在于凍干止血材料中,各材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇殼聚糖為5%2%1%,余量的水。3.根據權利要求1或2所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,其特征在于鼠尾膠原蛋白來(lái)源于各品系SFP級大鼠鼠尾。

    生物醫用鼠尾膠原蛋白的提取方法,采用酸法與酶法相結合的工藝,保持恒低溫無(wú)菌的環(huán)境,利用同樣濃度的鹽溶液進(jìn)行兩次鹽析與離心,簡(jiǎn)化了提純步驟。所用酸為低濃度酸溶液,并采用檸檬酸替代醋酸進(jìn)行提純。從提取原料到樣品生成過(guò)程中,進(jìn)行多次真空冷凍干燥,并經(jīng)進(jìn)一步處理獲得含水率在3%以下的膠原蛋白微粉;較后由滅菌、無(wú)菌包裝,成品膠原蛋白粉末的純度在98%以上。本發(fā)明獲得的膠原蛋白降低了蛋白的免疫原性,提高了產(chǎn)率和生物相容性,降低了成本,適用于生物醫用材料,所得到的膠原蛋白能完整地保留其特有的三股螺旋結構。鼠尾膠原醋酸溶解:稀釋一定數量的膠原溶液。

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    鼠尾膠原膠凝程序:膠原蛋白I按以下步驟使其pH達到堿性時(shí)凝膠。1)將無(wú)菌5cm左右的紗布海綿貼在150mm培養皿的蓋子上來(lái)制備氨蒸氣室。用氫氧化銨使紗布飽和,把蓋子放在150mm的培養皿上,暫放置一邊。2)將膠原蛋白I均勻涂布在要包被物的表面上,厚度可以根據需要改變,膠原蛋白I(50-100μL)足以涂覆22mm的蓋玻片。對于直徑100mm的培養皿,每個(gè)加入約6mL;對于60mm培養皿添加約2.3mL,對于35mm培養皿添加約1mL。3)將涂有膠原蛋白的蓋玻片或帶有蓋子的培養皿轉移到氨蒸氣室并暴露三分鐘。4)在無(wú)菌蒸餾水中(35mm培養皿加5mL,60mm培養皿加10mL等)浸泡涂布的蓋玻片或培養皿30min。吸取原蒸餾水并加0.5-1.0mL無(wú)菌蒸餾水,放置在層流罩中過(guò)夜。5)吸出蒸餾水,用含血清的平衡鹽緩沖液溶液代替并保存在2-8°C。鼠尾膠原蛋白還能用于制備三維膠。開(kāi)封鼠尾膠原直銷(xiāo)廠(chǎng)家

    鼠尾膠原蛋白 型在濃度1mg/ml 以上, pH 左右時(shí)可形成具有一定強度三維膠。珠海鼠尾膠原廠(chǎng)家

    膠原蛋白的提取方法:1.堿法提?。簤A法提取膠原蛋白常用的處理劑為石灰、氫氧化鈉、碳酸鈉等。如Holzer等[5]采用1%~1.5%石灰水浸泡的方法提取膠原蛋白。由于它容易造成肽鍵水解,因此得到的水解產(chǎn)物分子量比較低。所以,若想保留膠原的三股螺旋結構,此法不可取。2.鹽法提?。蝴}法提取膠原蛋白所用的中性鹽有鹽酸-三羥甲基胺基甲烷(Tris-HCl)、氯化鈉、檸檬酸鹽等。在中性條件下,當鹽的濃度達到一定量時(shí),膠原溶解。并且可采用不同濃度的氯化鈉對提取的膠原蛋白進(jìn)行鹽析處理,可以沉淀出不同類(lèi)型的膠原蛋白。珠海鼠尾膠原廠(chǎng)家

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